標(biāo)記試劑的平衡基團(tuán)、反應(yīng)基團(tuán)和報告基團(tuán)之間的鍵在質(zhì)譜分析的哪個階段斷裂

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TMT（Tandem Mass Tag）串聯(lián)質(zhì)量標(biāo)簽是一種體外肽標(biāo)記蛋白定量技術(shù)。TMT試劑標(biāo)簽由氨基反應(yīng)基團(tuán)、質(zhì)量平衡基團(tuán)和質(zhì)量報告基團(tuán)三部分組成，氨基反應(yīng)基團(tuán)能特異性識別多肽N末端和賴氨酸側(cè)鏈基團(tuán)并發(fā)生共價結(jié)合，形成多肽-氨基反應(yīng)基團(tuán)-質(zhì)量平衡基團(tuán)-質(zhì)量報告基團(tuán)復(fù)合物，實現(xiàn)多肽同位素標(biāo)記。

質(zhì)量報告基團(tuán)和質(zhì)量平衡基團(tuán)各有10種不同的分子量，但其組成的試劑標(biāo)簽的總質(zhì)量相同。一級質(zhì)譜中被TMT標(biāo)記的不同來源的同一肽段表現(xiàn)出相同的質(zhì)荷比；在二級質(zhì)譜中，TMT質(zhì)量報告基團(tuán)被斷裂，釋放出TMT報告離子；在三級質(zhì)譜中，TMT質(zhì)量平衡基團(tuán)被斷裂釋放。釋放出的質(zhì)量不同的報告離子通過二級質(zhì)譜和三級質(zhì)譜檢測得到來自不同肽段的報告離子峰強(qiáng)度與離子峰質(zhì)荷比，通過軟件結(jié)合相應(yīng)數(shù)據(jù)庫對離子峰強(qiáng)度和質(zhì)荷比值進(jìn)行分析，可以計算樣品蛋白的含量。

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